固相增強樣品制備技術凈化蛋白質組樣本（SP3）
技術簡介
在蛋白質組學中，高效分離蛋白質與小分子（如鹽離子、去污劑、有機小分子等）是確保質譜分析靈敏度和準確性的關鍵環節。尤其在疾病標志物發現、藥物開發及臨床樣本分析中具有重要應用。傳統方法如甲醇-氯仿或丙酮沉淀依賴反復離心與干燥，易導致蛋白質聚集或低豐度組分丟失，且對強變性劑（如SDS）兼容性差；而過濾輔助樣品制備（FASP）雖能去除小分子干擾，卻因超濾膜吸附效應造成高分子量蛋白損失，步驟繁瑣且難以處理微量樣本。
固相增強樣品制備技術（single-pot, solid-phase-enhanced sample-preparation，SP3）[1]，通過磁珠表面動態親水作用直接捕獲蛋白質，在單管內即可完成雜質清除、蛋白富集與酶解消化，避免了傳統多步驟分離流程，極大提升了實驗通量和重復性。這一技術不僅解決了傳統方法的局限性，更推動了蛋白質組學前沿領域的發展，是現代蛋白質組學標準化流程的核心工具之一。廈門普睿邁格生物推出自主研發的SP3-Carboxyl磁珠試劑盒。本磁珠以聚苯乙烯-納米氧化鐵復合材質為基核，通過創新工藝優化親水表面特性（具有親水和疏水表面供選擇），具有接近100%的回收率，耐受1% SDS、6M尿素等強變性體系，適用于細胞、組織、體液等多類型樣本，操作簡便性等優勢，提供比同類進口磁珠更高的性價比。（點擊http://www.kismrs.cn/Product/1736805216.html獲取產品更多詳情）
技術流程和原理
SP3是一種基于順磁顆粒的蛋白質組預處理工作流程，通過有機溶劑乙醇或乙腈驅動驅動蛋白在羧基或其它親水性磁珠表面被捕獲。蛋白質通過親水相互作用機制與磁珠結合，結合了蛋白的磁珠被束縛在溶劑化層，可沖洗去除不需要的污染物，然后在一定條件下洗脫純化的蛋白質。
技術優勢
- 簡單，成本低，僅需磁力架和樣品管，所有步驟都在單管中完成；
- 快速，整個蛋白質沉淀、洗滌、除鹽及洗脫步驟，僅需20min；
- 接近100%回收率，無偏回收蛋白質；
- 適用體系廣，能夠適合多種緩沖鹽體系，不同物種及不同蛋白量。
參考文獻
Single-pot, solid-phase-enhanced sample preparation for proteomics experiments. Nat. Protoc. 2019, 14, 68-85
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